Выделение Днк Из Слюны Этапы

50µg на 2ml слюней (если ещё и щеку тереть). Приблизительно столько же получается при стандартной фенол-хлороформенной очистке.
ТКак ни странно, одного silica-фильтрика диаметром 6mm вполне хватает для очистки. Странно потому, что для ПЦР-продуктов ёмкость такого фильтрика должна быть

8.7. В случае достижения цели обработки персональных данных Оператор обязан прекратить обработку персональных данных и уничтожить персональные данные в срок, не превышающий 30 рабочих дней с даты достижения цели обработки персональных данных, если иное не предусмотрено договором, стороной которого является субъект персональных данных.

Настоящее Согласие дано Оператору для совершения следующих действий с моими персональными данными с использованием средств автоматизации и/или без использования таких средств: сбор, запись, систематизация, накопление, хранение, уточнение (обновлением, изменение), извлечение, использование, обезличивание, передача третьим лицам для указанных ниже целей, а также для осуществления любых иных действий, предусмотренных Федеральным законом №152-ФЗ «О персональных данных».

7.1. Принимая настоящее Соглашение, Пользователь Сайта дает согласие на получение информационных, рекламных сообщений о планируемых к проведению семинаров, конференций иных профессиональных мероприятий, о товарах и услугах, а также о проведении рекламных акций, кампаний, маркетинговых исследований и иной любой другой информации.

8.2. Ответственность за правомерность и достоверность персональных данных Пользователя несет исключительно предоставившее их лицо. Администрация Сайта/ Оператор не принимает на себя никаких обязательств по проверке персональных данных, указанных Пользователем.

Обработка персональных данных – любое действие (операция) или совокупность действий (операций), совершаемых с использованием средств автоматизации или без использования таких средств с персональными данными, включая сбор, запись, систематизацию, накопление, хранение, уточнение (обновление, изменение), извлечение, использование, передачу (распространение, предоставление, доступ), обезличивание, блокирование, удаление, уничтожение персональных данных.

Диагностические возможности слюны

Имевшие до недавнего времени затруднения использования слюны в диагностических целях из-за недостаточно изученного гематосаливарного барьера, низкого уровня определения, сложности обнаружения, а также из-за того, что не всегда получаемые показатели коррелируют с таковыми в плазме крови были в значительной степени устранены в результате тщательного изучения физиологии слюнных желез, разработки чувствительных методов амплификации, методологии забора и обработки образцов слюны. Последние достижения в диагностике по слюне были обусловлены новыми молекулярными подходами (протеомики, геномики и транскриптомики) и метагеномными анализами.

Анализ слюны для экспертизы ДНК . Наиболее широко используемый вид образца из полости рта — это мазок, при исследовании которого можно получить дезоксирибонуклеиновую кислоту (ДНК) образца. Это используется многие годы в судебно-медицинских исследованиях, а в последнее время – для анализа одиночных нуклеотидных полиморфизмов мутаций, связанных со специфическими заболеваниями. За счет выделения ДНК из слюны возможно типирование АВО (системы генов, определяющих группу крови). K. Aki и соавт. (2012) показали, что достаточно простой и широко используемый в судебно-медицинской области метод проточной цитометрии может быть полезен для сравнения различий между экспрессией антигенов A и/или B и H красных кровяных клеток с различным фенотипом и методом PASA для определения генотипа cisA(2)B(3) родословной. Образец ДНК может быть взят из различных областей в/на теле человека, а проба слюны удобна для использования: ротовой ершик помещают в стабилизированную для транспортировки среду и отправляют в лабораторию для анализа. Генотипирование лиц с нарушением последовательности ДНК имеет коммерческий успех, однако его медицинское значение спорно и не отвечает научной точности.

В последнее время большое внимание уделяется неинвазивным методам исследования, исключающим возможность инфицирования больного и стрессового воздействия при взятии крови. Удобным объектом неинвазивного метода является слюна. Медиков привлекают также простота взятия и анализа проб слюны, легкость ее хранения, возможность частого взятия проб и полная безопасность при этом для здоровья пациента.

Основное же внимание исследователей привлекают возможности диагностирования патологических состояний разных систем организма. Слюна идеально подходит для диагностики, так как содержит специфические растворимые биологические маркеры (биомаркеры), имеет осмотическое давление и гидратацию. Возрастает интерес к использованию слюны и других образцов из полости рта для диагностики системных заболеваний и болезней полости рта. Это особенно важно в ряде популяций и при обследовании детей и престарелых, при ограниченном доступе к медицинской помощи в удаленных географических районах, где забор крови невозможен. Для обоснования концепции о том, что саливарный диагностический тест предпочтительнее по сравнению с инвазивными альтернативами, достаточно напомнить об успешном использовании орального термометра, который полностью заменил своего предшественника, ректальный термометр.

Биомаркеры слюны для диагностики инфекционных заболеваний . Многие молекулы, полученные из слюны или десневой жидкости, используются в качестве диагностических биомаркеров заболеваний полости рта, включая состояния, вызванные грибами (Candida), вирусами папилломы человека (ВПЧ), вирус Эпштейна-Барр (ВЭБ), цитомегаловирусом (ЦМВ) и бактериями (несколько видов, участвующих в заболеваниях пародонта и кариесе). Орофарингеальный кандидоз является одним из наиболее распространенных заболеваний полости рта, чаще всего вызван Candida Albicans, изначально был описан как псевдомембранозный, гиперпластический и эритематозный, а хроническое наличие наблюдается также на коже и слизистых оболочках. Недавнее исследование показало, что микрофлора слюны состоит из Candida — 75%, Cladosporium — 65%, Aureobasidium и Saccharomycetales — 50%, Aspergillus — 35%, Fusarium — 30% и Cryptococcus — 20%. Диагноз орального кандидоза основывается на наличии культуры возбудителя в пробирке или идентификации путем визуализации под микроскопом. На сегодняшний день слюна применяется в основном для выделения возбудителя, о наборах для обнаружения антигена Candida уже сообщалось. Экспериментальные попытки были также сделаны для обна- ружения слюнных IgA- или IgG-антител к Candida, но иммунодиагностика остается недостижимой из-за различия в чувствительности и специфичности различных анализов при обнаружении различных антигенов Candida.

Выделение ДНК

Процедура выполняется в лабораторных условиях с соблюдением строгих требований стерильности, так как даже в воздухе тщательно убранного помещения могут быть обнаружены частички пыли и неразличимых мельчайших биологических объектов (например, споры грибков), содержащих гены живых организмов.

Выделение ДНК имеет большое значение для ПЦР-диагностики и является первым этапом данного вида исследования. Впоследствии выполняют амплификацию полученных фрагментов, в основу которой положен процесс достраивания молекул из имеющихся частиц. В завершение осуществляется детекция полученных продуктов, заключающаяся в добавлении в смесь некоторых растворов, которые «заставляют» светиться отдельные фрагменты различных вирусов.

Выделение плазмидной ДНК основано на использовании щелочного метода, в процессе которого постепенно изменяют кислотность раствора в щелочную сторону. При этом плазмидные цепи остаются прочно связанными вместе, так как имеют обычно кольцевую форму. В ходе последующей ренатурации изменяют рН раствора до начального уровня, вследствие чего геномные цепи, которые ранее разошлись, слипаются в уплотненный комок, а плазмидные – восстанавливают первоначальную структуру и в результате их легко отделить от общей массы при центрифугировании

Затем осуществляется лизис мембран клеток с применением различных веществ, разрушающих структуру белка (протеиназы К для разрушения протеинов или РНКазы для разрушения РНК). В результате получается мультикомпонентный раствор, который содержит клеточные геномы.

Все инструменты и приспособления, применяемые для забора образца для анализа, а также при проведении последующих манипуляций, должны быть стерильными и по возможности одноразовыми. Соблюдение этого условия позволяет значительно повысить точность исследования и получить максимально достоверный результат.

Выделение ДНК: первый этап генетического анализа

ДНК — это длинная молекула с отрицательным зарядом: она кодирует инструкцию по сборке отдельных белков, клеток, тканей и целых организмов. ДНК содержится во всех клетках за редкими исключениями: например, зрелые эритроциты млекопитающих теряют ядро с генетическим материалом, чтобы лучше переносить кислород. Поэтому выделить ДНК можно из любой ткани живого или мертвого организма — вопрос только в том, сколько усилий придется затратить.

Сотрудники лаборатории Genotek успешно справлялись с иголками сосны, стволовыми клетками, йогуртами, зародышами лягушек, сердцами мышей и золотистым стафилококком, а автор этой статьи на студенческом практикуме выделяла ДНК из консервированной кукурузы. Но чаще всего источником генетического материала для анализа становится кровь или слюна человека.

Обработка биоматериала и выделение ДНК — это первый этап молекулярно-биологического исследования. Генетический материал хранится в ядрах клеток, которые нужно разрушить, иначе ДНК не выйдет в раствор и будет недоступна для анализа. Из клеток животных часть ДНК можно высвободить простым нагреванием, а вот с клетками растений это не пройдет: они защищены прочной клеточной стенкой из целлюлозы.

Самые распространенные ингибиторы в биологических тканях — это гем (компонент эритроцитов, который позволяет им переносить кислород), коллаген в костях и других соединительных тканях, меланин в волосах и коже, ароматические соединения в растительных образцах, миоглобин в тканях мыщц (1, 2). В слюне анализу мешают остатки пищи и консервант, который используется для хранения и перевозки образца: он содержит SDS, ингибирующий работу ферментов. При перевозке SDS защищает ДНК от разрушения, но при попадании в реакционную смесь нарушает работу ДНК-полимеразы.

Заявляемый способ выделения ДНК имеет изобретательский уровень, поскольку не выявлены технические решения, имеющие признаки, совпадающие с отличительными признаками данного изобретения, и не установлена известность влияния отличительных признаков на указанный технический результат.

Заявляемый способ — безопасный, применяемые при выделении ДНК компоненты абсолютно безвредны для человека. Способ позволяет выполнять выделение ДНК из широкого спектра биологических объектов, недоступных для прототипа и аналогов, то есть обладает расширенной областью применения. Перечисленные результаты применения заявляемого способа подтверждают его новизну. Заявляемый способ выделения ДНК — осуществимый с применением стандартных технических устройств и оборудования в промышленном производстве продуктов питания, в деятельности организаций здравоохранения, полиции, животноводства. Это соответствует предъявляемому к изобретениям критерию «промышленная применимость»,

Недостатком прототипа является ограниченность области применения способа [3] при необходимости выделения ДНК из широкого спектра различных биологических объектов (крови, слюны, волос), как это бывает, например, при проведении судебно-медицинской экспертизы. Низкое количество выделенной ДНК из костной и мышечной тканей, ногтевых пластин также ограничивает применение прототипа.

Известен способ выделения ДНК с использованием хелатирующего реагента — ионообменной смолы Челекс-100 (Chelex-100) [2]. Недостатком является низкое качество выделенного по способу [2] препарата ДНК из-за наличия посторонних примесей (продуктов лизиса клеток), невозможность выделения ДНК из костных и мышечных тканей, загрязнение препарата ДНК продуктами лизиса клеток (белки, липиды).

К клеточному лизату добавляют ранее приготовленный сорбент Fe₃O₄ в 0,015 М ацетатном буферном растворе, например, в количестве 20 мкл взвеси модифицированных наночастиц на 1 мл клеточного лизата. Взвесь перемешивают (суспендируют), например, автоматической пипеткой. Затем перемешанную взвесь инкубируют в течение 30 мин, при температуре в диапазоне плюс 15-30°С. Пробирку с взвесью подвергают воздействию постоянного магнитного поля, например, путем помещения пробирки на стандартный лабораторный магнитный штатив. Под воздействием магнитного поля происходит разделение суспензии на две фазы: осадок — сорбент Fe₃O₄ со связавшимися с ним молекулами ДНК и надосадок — лизирующий буферный раствор. Надосадок (супернатант) удаляют, а к осадку приливают отмывочный (элюирующий) буферный раствор, например, состава: 10 мМ трис-HCl, рН 7,4; 100 мМ NaCl; 1 мМ ЭДТА. Смесь перемешивают, например, автоматической пипеткой, затем пробирку помещают на стандартный лабораторный магнитный штатив, где под действием постоянного магнитного поля происходит разделение суспензии на две фазы: осадок — сорбент наночастиц Fe₃O₄ и надосадок — элюирующий буферный раствор с молекулами ДНК. Надосадок отбирают в чистые емкости, например пробирки типа Эппендорф. Отобранный надосадок является конечным продуктом — раствором, содержащим выделенный препарат ДНК. Выделенный препарат ДНК в растворе применяют по назначению, например для постановки реакции амплификации.

Протокол твердофазной экстракции включает четыре ключевых шага: клеточный лизис; адсорбцию нуклеиновых кислот, отмывку и десорбцию (элюцию). Исходным этапом является установка колонки для адсорбции образца. Подготовка колонки производится с использованием буфера с определенным pH – для того, чтобы придать поверхностным структурам (или функциональным группам) сорбента необходимые свойства – только в таком случае ДНК или РНК будут «налипать» на носитель. Следующий шаг – образец, расщепленный с помощью лизирующего буфера, помещают на колонку. Искомая нуклеиновая кислота адсорбируется на колонке за счет высокого pH и концентрации солей в связывающем растворе (binding solution). Прочие составляющие, такие как белки, также могут образовывать прочные специфические соединения с поверхностью колонки. Эти нежелательные примеси можно удалить на стадии промывания, используя промывочный буфер (wash buffer), который содержит вещества, не дающие им адсорбироваться. Для того, чтобы высвободить нуклеиновую кислоту с колонки на стадии десорбции, используется ТЕ-буфер или MQ-вода.
Так называемые селективные носители (mixed-bed solid phases) представляют собой смесь по крайней мере двух различных сорбентов, которые могут быть твердыми или полутвердыми, пористыми или непористыми. Каждый из них способен связываться с целевой нуклеиновой кислотой при определенных условиях.

В данной методике нуклеиновые кислоты выделяются прямо на специальной бумаге, пропитанной смесью реагентов, связывающих ДНК. Для выделения достаточно нанести каплю образца на карту, после чего нанести на нее буфер для выделения и высушить. В дальнейшем, карту можно разрезать на фрагменты и загружать прямо в пробирку для ПЦР. Данный метод подходит только для жидких образцов и не пригоден для ПЦР в реальном времени, однако по времени анализа ему нет равных.

Экстракцию нуклеиновых кислот следует начинать как можно скорее после отбора свежих тканей. Ткань может храниться в условиях низкой температуры в холодильнике в течение нескольких дней без риска деградации НК. Однако, если выделение невозможно в ближайшее время, образец должен быть заморожен до температуры от -20°C до -80°C. При этом целесообразно использовать для хранения и перевозки образцов одноразовую пластиковую пробирку или другие плотно закрывающиеся емкости.

Выделение нуклеиновых кислот – один из базовых методов молекулярной биологии. В прошлом процесс выделения и очистки НК был сложным, времязатратным, трудоемким и имел ограничения с точки зрения скорости обработки образцов. На сегодняшний день имеется множество специализированных методик, которые могут использоваться для выделения нуклеиновых кислот с высокой степенью очистки. Их можно условно разделить на две группы: осаждение НК на суспензионный носитель и выделение на колонках. Безусловно, традиционные методы выделения являются надежными и прошли испытание временем, но сейчас на рынке имеется широкий ассортимент товаров, включая полные наборы, содержащие большинство реагентов, необходимых для выделения нуклеиновых кислот. Однако, большинство из них все же требует многократных этапов центрифугирования, которые сопровождаются удалением супернатанта (прим. фаза дисперсионной системы, которая располагается сверху от границы раздела фаз).
В последний годы повысился спрос на автоматические системы. Разработанные для средних и крупных лабораторий, они являются альтернативой трудоемкому ручному методу. Данная технология значительно повышает производительность лаборатории. При этом выход НК и чистота материала, воспроизводимость и прогностичность эксперимента будут максимальными (так же как скорость, точность и надежность анализа в целом), а риск кросс-контаминации (перекрестного заражения) минимизируется.

Прежде всего, биологические образцы должны быть взяты в достаточном количестве для проведения анализа, кроме того, образца должно хватить для проведения повторного анализа. При этом необходимо учитывать вариации содержания НК в различных органах и тканях, а также уменьшение содержания НК из-за деградации, если образец был взят через большой промежуток времени после смерти животного.

Выделение слюны у человека

Этиология птиализма у женщин, вынашивающих ребенка, заключается в нейроэндокринных нарушениях , которые способствуют развитию раннего или позднего токсикоза. Данное состояние сопровождается тошнотой, обильным выделением слюнной жидкости, иногда рвотой.

• • заболевание полости рта – стоматит, молочница и пр.;
  • дизартрия и прочие последствия нарушения работы нервной системы;
  • детский церебральный паралич – из-за болезни отсутствует координация между оральными мышцами, и глотание слюны значительно затрудняется. В такой ситуации чрезмерного слюноотделения нет, она течет изо рта из-за сложностей с глотательной функцией;
  • перинатальное поражение головного мозга;
  • травмы головного мозга в результате ушибов и ударов.

Перечисленные выше домашние средства безопасны, полезны и эффективны. Противопоказанием может быть лишь аллергическая реакция, индивидуальная непереносимость. Они хорошо приостанавливают обильное слюноотделение, позволяя улучшить качество жизни. Принимайте рекомендованные средства на регулярной основе. Это позволит остановить повышенное выделение слюны, добиться поставленных результатов.

• • Лекарственная терапия некоторыми группами фармакологических средств, употребление которых может вызвать гиперсаливацию, как побочный эффект.
  • Нарушенные обменные процессы в организме.
  • Расстройства неврологического характера.
  • Токсикоинфекция либо острое отравление.
  • Некоторые патологические процессы в ЛОР-органах.

Повышенное слюноотделение является проблемой для многих людей с неврологическими или нервно-мышечными расстройствами. Оно имеет множество причин возникновения, которые можно разделить на две основные категории: избыток слюны и неспособность контролировать слюну должным образом. В результате обильное слюноотделение может привести к локальным осложнениям, развитию инфекций, последующему обезвоживанию организма. Кроме того, проявляются психологические проблемы, изменение поведения в социальном взаимодействии.

Методы выделения днк из биологического материала

К сожалению, уровень развития генетики в нашей стране, значительно уступает коллегам из Западных стран, минимум на десять лет. Так, например, в Англии тест на ДНК, проводят каждому человеку, который хотя бы раз был привлечён к уголовной ответственности за любое совершённое преступление. После чего этот анализ хранится многие годы, а в случае, если он повторно нарушит закон, его личность будет сразу же выявлена.

Конечно, существуют допустимые отклонения от правил, например, в случае, когда требуется установить личность погибшего, а материал получают уже из останков или одежды, но подобного рода экстракция не всегда, получается, из-за неудовлетворительного качества образца.

Криминалисты активно работают с этим направлением, так как, к примеру, ими был найден в чаще платок или другая вещь, косвенно принадлежащая пропавшему человеку, при помощи анализа можно с точностью установить принадлежит ли этот предмет исчезнувшей особе или нет и выявить на правильном ли пути следователи.

Подобных историй, практикующихся на Западе, но пока не применяемых на просторах нашей родины, достаточно много. Но хочется верить, что генетические экспертизы станут боле доступными и у нас, позволив создавать свою уникальную базу, которая сможет помочь миллионам людей, а какой из методов при этом будет применён для получения данных, станет не столь глобальным вопросом!

* Важно не допускать повторные заморозки и оттаивания образца по причине того, что эти процессы негативно сказываются на структуре самой ДНК, может нарушаться ее целостность. Итогом это может стать затруднение и затягивание анализа, либо его полная невозможность.

Принцип выделения
РНК прикрепляется к колонки при помощи аффинного связывания,при этом при помощи размера пор возможно разделить РНК по размеру.
Тотальная РНК, в растворе этанола проходит через связывающую колонку, где большие фрагменты РНК остаются связанными, а малые смываются в супернатант. Далее супернатант, содержащие малые РНК проходит через колонку для выделения малых РНК, где связываются малые молекулы.

Было показано, что малые РНК с малым содержанием GC могут быть селективно потеряны при очистке с использованим фенола (Kim et al., Molecular Cell 46(6): 2012).
Таблица 1. Типы образцов, из которых возможно выделять микро РНК, РНК, ДНК и протеины при помощи наборов для выделения ISOLATE II

3. Набор для выделения микроРНК и набор для выделения микроРНК из растений
Набор был разработан для выделения обогащенной микроРНК (размер составляет Какие типы малых РНК выделяются:
1. регуляторные молекулы РНК (такие например как микроРНК (miRNA)
2. короткие интерферирующие РНК (siRNA),
3. транспортные РНК (tRNA)
4. РНК из 5Sсубъединицы (rRNA)
Малые РНК, имеющие длину 20-25 нуклеотидов, вовлечены в регуляцию генной экспрессии при помощи связывания с мессенджер РНК (mRNA)

Откуда выделяется вирусная РНК?
Кроме перечисленных выше типов образцов, также из культивируемых клеток и тканей.
Принцип выделения:
Колоночное выделение с использованием аффинного полимера, связывающего РНК разного размера (используется новый тип silica, к которой преимущественно присоединяются малые РНК). Набор не использует фенол и хлороформ.
Образцы подвергаются лизису в присутствии гуанидиниум тиоционата, и хаотропных солей, которые деактивируют эндогенные РНКазы и позволяют выделить неповрежденную РНК. Затем, геномная ДНК захватывается колонками и удаляется. Добавляется этанол, и РНК переносится в колонку для выделения РНК. Далее, тотальная РНК задерживается колонкой и может быть избавлена от примесей при промывании.
Полученная высокочистая РНК может быть использована в следующих экспериментах:
1. реал-тайм ПЦР (qPCR)
2. реакция обратной транскрипции
3. синтез кДНК
4. секвенирование следующего поколения
5. Nothern blotting

Мы продолжаем расширять нашу линейку для колоночного выделения нуклеиновых кислот из самых разных образцов. Сегодня мы хотим обратить внимание всех, кто работает с микроРНК, тотальной РНК, а также с образцами тканей в парафине на новинки для колоночного выделения.
Набор для выделения РНК из биологических жидкостей позволяет выделить РНК высокого качества из физиологических жидкостей — крови/сыворотки, мазков изо рта, клеточных культур, вирусов.
Набор для выделения микро РНК и набор для выделения микро РНК из растений позволяет получить тотальную РНК и микроРНК из самых различных образцов (см. Табл. 1 в тексте).
Набор для выделения РНК/ДНК из тканей, зафиксированных формалином в парафине позволяет получить геномную ДНК и тотальную РНК хорошего качества из проблемных образцов.
Набор для выделения ДНК/РНК/протеинов позволяет выделить три различных типа макромолекул из одного образца без этапа экстракции органическими растворителями.

Выделение ДНК

Выделение ДНК * выдзяленне ДНК * DNA extraction — совокупность технических приемов, включающих этапы разрушения клеток или тканей, выделения ядер, обработки протеинкиназой К или др. типами протеиназ, депротеинизации ДНК фенолом и хлороформом, осаждения этанолом или диализа. В качестве дополнительной очистки используются обработка РНКазой и центрифугирование в плотности хлористого цезия. Процедуру выделения ДНК можно ускорить за счет совмещения различных этапов: напр., лизис клеток проводят в присутствии РНКазы (100 мкг/ мл), что позволяет на ранних этапах выделения освободиться от основной части РНК, либо вообще исключают обработку препаратов ДНК РНКазой, предпочитая добавлять ее (1 нг/мкл) в инкубационную смесь при рестрикции. В ряде случаев в лизирующий буфер вводят реагенты (формамид, мочевина), способствующие лизису клеток и разрушению ДНК-белковых комплексов. Использование мочевины в сочетании с высокой концентрацией солей и додецилсульфата натрия ( SDS ) позволяет избирательно осадить основную часть белков и РНК, тем самым ускоряя длительную процедуру депротеинизации ДНК. При выделении ДНК из животных тканей для более эффективной ее очистки с успехом используются высокие концентрации формамида, перхлората натрия, хлорида натрия. Интерес представляет метод, использующий электрофильтрацию лизата ядер через мембрану ХМ-300. В этом случае высокополимерная ДНК задерживается на мембране, в то время как белки, РНК и низкомолекулярные вещества уходят в электрофоретический буфер. Существует также ряд других методов В. ДНК, в т. ч. частично и даже полностью автоматизированных (роботизированная станция EVO7 TECAN, напр.).

Биология — (от Био. и . Логия совокупность наук о живой природе. Предмет изучения Б. все проявления жизни: строение и функции живых существ и их природных сообществ, их распространение, происхождение и развитие, связи друг с другом и с неживой… … Большая советская энциклопедия

ДНК-ИДЕНТИФИКАЦИЯ — или типирование ДНК, установление генетической индивидуальности любого организма на основе анализа особенностей его дезоксирибонуклеинововой кислоты (ДНК). Получаемый при типировании профиль ДНК, как и отпечатки пальцев, может использоваться для… … Энциклопедия Кольера

ДНК-микрочип — Термин ДНК микрочип Термин на английском DNA microarray Синонимы ДНК чип, DNA chip, Gene сhip, DNA chip Аббревиатуры Связанные термины биосенсор, геном, ДНК, ДНК зонд, лаборатория на чипе, РНК, олигонуклеотид Определение Миниатюрная пластина с… … Энциклопедический словарь нанотехнологий

ДНК — Термин ДНК Термин на английском DNA Синонимы дезоксирибонуклеиновая кислота Аббревиатуры ДНК Связанные термины доставка генов, актуатор, бактериофаг, белки, биологические нанообъекты, биомиметика, биомиметические наноматериалы, генная инженерия,… … Энциклопедический словарь нанотехнологий

Современные методы выделения ДНК: преимущества и особенности

Суть этого метода выделения ДНК из крови заключается в связывании НК со специальным веществом (сефадексом, целлюлозой, dT-олигонуклеотидами и т. д.), которое покрывает магнитные микроносители. Клеточный лизат соединяют с магнитными частицами, после чего пробирку подносят близко к магниту либо устанавливают в магнитный штатив. В результате происходит агрегирование частиц. После отбора супернатанта НК элюируют.

Протокол получил распространение в 2005 году. Для получения чистой нуклеиновой кислоты берут наконечники с немагнитными частицами, имеющими «умную» поверхность. В эти наконечники происходит сбор клеточного лизата, во время чего НК соединяется с немагнитными частицами. После промывки и элюции выделяется высококачественная нуклеиновая кислота.

Экстракция НК — одна из основных технологий в молекулярной биологии. Раньше протокол выделения нуклеиновых кислот был трудозатратным и занимал много времени, а полученные образцы не всегда отличались высоким качеством. Сегодня есть большое количество прогрессивных методов, которые дают возможность получать высокоочищенную НК.

• Для работы не нужна центрифуга и другое подобное оборудование
• Органические растворители, осаждение на колонках и вакуумная фильтрация тоже не нужны
• Многоэтапное центрифугирование отсутствует, поэтому процесс длится меньше времени, чем при других вышеупомянутых методах
• При желании процедуру можно автоматизировать

• Нет потери нуклеиновой кислоты, поэтому метод подходит даже при наличии небольшого количества биоматериала
• Процесс можно автоматизировать
• Время экстракции — от 7 минут (это самый быстрый способ выделения среди вышеуказанных)
• Невысокая цена

Сперва стопку необходимо на четверть наполнить слюной – именно из слюны, содержащей немало клеток с внутренней стороны щек, и предполагается извлекать ДНК. После этого нужно добавить несколько капель моющего средства. Входящие в его состав поверхностно-активные вещества вызывают лизис клеток – их мембраны разрушаются, а содержимое попадает в раствор.

Интернет-ресурс Popular Science представил своим пользователям видеоинструкцию по выделению ДНК в домашних условиях. Для этого потребуется стеклянная стопка, средство для мытья посуды, ананасовый сок, поваренная соль, крепкий алкоголь, трубочка для напитков и зубочистка.

Содержимое стопки необходимо перемешать, после чего с помощью трубочки для напитков добавить несколько капель алкоголя – «кухонные биологи» из PopularScience используют для этих целей ром. Образовавшиеся в жидкости «нити» и есть ДНК, извлечь из раствора их можно с помощью зубочистки.

Выделенную ДНК авторы предлагают попробовать проанализировать: для этого из конструктора ЛЕГО и контейнеров, для хранения еды, можно сконструировать прототип лабораторного оборудования для разделения фрагментов ДНК или же попробовать провести реакцию ПЦР – методика проведения ПЦР в домашних условиях также прилагается.

Похожие записи
• 
  Какая Стоимость Развода В Узбекистане Госпошлину
• 
  Тула февраль 2023 выплаты ветеранам труда
• 
  Самарская область размер пенсии по инвалидности
• 
  Снижение Ставки По Ипотеке В 2023 Году В Сбербанке По Ранее Выданным